هڪ فلوروسينس خوردبيني هڪ قسم جو نظرياتي خوردبيني آهي جيڪو نموني کي روشن ڪرڻ ۽ نموني ۾ فلوروڪووم کي حوصلا افزائي ڪرڻ لاء هڪ تيز شدت واري روشني جو ذريعو استعمال ڪري ٿو. نموني جي روشني عام طور تي روشني جي ذريعن سان ڪئي ويندي آهي جيڪا الٽرا وائلٽ روشني کي خارج ڪري ٿي. اهي وڏي پيماني تي حياتياتي، طبي ۽ صنعتي شعبن ۾ استعمال ٿيندا آهن.
فلورسنس خوردبيني ڪيئن ڪم ڪندو آهي؟
هڪ فلوروسينس خوردبيني الٽرا وائلٽ روشني پيدا ڪرڻ لاء پارا يا زينون چراغ استعمال ڪري ٿو. روشني خوردبيني ۾ اچي ٿي ۽ هڪ ڊيڪروڪ آئيني سان ٽڪرائجي ٿي - هڪ آئينو جيڪو موج جي هڪ حد کي ظاهر ڪري ٿو ۽ ٻي حد کي گذرڻ جي اجازت ڏئي ٿو. ڊيڪروڪ آئيني نموني تائين الٽرا وائلٽ روشني کي ظاهر ڪري ٿو. ڪي نمونا قدرتي طور تي الٽرا وائلٽ روشنيءَ هيٺ لهن ٿا ڇاڪاڻ ته انهن ۾ فلورسنٽ مواد جهڙوڪ ڪلوروفل شامل آهن. جيڪڏهن ڏٺو وڃي ته نمونو قدرتي طور تي فلورس نه آهي، اهو فلوروسنٽ رنگن سان داغ ٿي سگهي ٿو جنهن کي فلورو ڪرومس سڏيو ويندو آهي.
فلورسنس خوردبيني ڇا تي مشتمل آهي؟
1. روشني جو ذريعو
سڀ کان وڌيڪ عام روشني جا ذريعا پارا، زينون ۽ ايل اي ڊي آهن. پارو فلورسنس خوردبيني لاءِ روشني جي بهترين معيار فراهم ڪري ٿو. LEDs وڌيڪ مقبول ٿي رهيا آهن ڇاڪاڻ ته اهي ٻين ذريعن جي ڀيٽ ۾ گهٽ قيمتي آهن ۽ اهي گهٽ بجلي استعمال ڪن ٿا.
| پاري جي چراغ | زينون چراغ | ايل اي ڊي | |
| Emitted Light جي Wavelength | 350-370 nm | 400nm - 450nm | 400-700 nm |
| لائف ٽائيم (ڪلاڪ) | 200-300 | 400-600 | 10000 |
| فائدو | 1. تيز شدت واري روشني، سڀ کان وڌيڪ عام روشني ذريعن. 2. اهو مضبوط الٽرا وائلٽ ۽ نيري وايوليٽ خارج ڪري ٿو ته جيئن هر قسم جي فلوروفورس کي اتساهه ڏئي. 3. روشن ۽ رنگين تصويرون. | 1. چشمي جي شدت مستحڪم آهي. 2. انفراريڊ ۽ وچ-انفرارڊ ۾ مضبوط اسپيڪٽرل شدت. | 1. تبديل ڪرڻ آسان. 2. گرم ڪرڻ جي ضرورت ناهي. 3. فوري طور تي بند ۽ بند ڪري سگھجي ٿو. 4. روشني جي ذريعن جي شدت کي ڪنٽرول ڪريو. |
| ناانصافي | 1. هڪ مختصر زندگي. 2. ڊگهو گرم وقت. | 1. خاص گھٽ وولٹیج ڊي سي پاور باڪس اضافي گرمي لاءِ گھربل آھي. 2. پاري چراغ کان وڌيڪ قيمتي | 1. UV روشني پاري جي چراغ کان ڪمزور آهي. 2. روشنيءَ جي هر موج کي الڳ LED جي ضرورت هوندي آهي ڇاڪاڻ ته انهن مان نڪرندڙ تنگ بينڊوڊٿس جي ڪري. |
پارو فلورسنٽ منسلڪ
LED فلورسنٽ منسلڪ
2. Excitation فلٽر
جوش فلٽر فلورسنس خوردبيني جي آپريشن لاء ضروري آهي. اهو هڪ ننڍڙي موج جي روشني کي گذري ٿو، جنهن کي فلورسنٽ رنگ جذب ڪري سگهي ٿو. انهي سان گڏ، اهو دلچسپ روشني جي ٻين ذريعن کي بلاڪ ڪري ٿو.
اتساهه فلٽر (بي، جي، يو، وي)
3. Dichroic Mirror
Dichroic Mirror هڪ قسم جو آپٽيڪل فلٽر آهي جيڪو روشنيءَ کي ڪجهه موج جي ڊيگهه تي ظاهر ڪري ٿو جڏهن ته ٻين کي منتقل ڪري ٿو. اهو fluorescence microscopes ۾ استعمال ڪيو ويندو آهي excitation ۽ emition wavelengths کي الڳ ڪرڻ لاءِ.
4. اخراج فلٽر
اخراج فلٽر صرف فلوروفور پاران خارج ٿيل موج جي ڊيگهه کي پاس ڪري ٿو ۽ هن بينڊ جي ٻاهران تمام ناپسنديده روشني کي بلاڪ ڪري ٿو - خاص طور تي حوصلا افزائي واري موج.
5. فلورسنٽ رنگ
فلورسنٽ رنگ نامياتي مرکبات آهن جيڪي فلورسنس جي ملڪيت رکن ٿا، جنهن جي ذريعي اهي انتهائي روشني واري الٽرا وائلٽ روشني کان پرجوش ٿيڻ کان پوء انتهائي برعڪس نظر ايندڙ سائي روشني کي خارج ڪري هڪ فلوروسنٽ تصوير ٺاهي سگهن ٿا. عام طور تي استعمال ٿيل فلورسنٽ رنگ آهن؛ DAPI (49,6-diamidino-2-phenylindole), acridine نارنگي، auramine-rhodamine، Alexa Fluors، or DyLight 488.
فلورسنس خوردبيني جا ڪيترا قسم آهن؟
1. اپرائيٽ Epifluorescence Microscope:
اهو سڀ کان عام قسم جو فلوروسينس خوردبيني آهي. fluorophore جي excitation ۽ fluorescence جو پتو لڳائڻ ساڳئي روشني رستي (يعني مقصد ذريعي) ڪيو ويندو آهي. فلوروسينس خوردبيني جي اڪثريت، خاص طور تي جيڪي حياتياتي سائنس ۾ استعمال ڪيا ويا آهن، ايپي فلوروسينس ڊيزائن جا آهن.
BS-2081F ريسرچ فلورسنٽ حياتياتي خوردبيني
2. Confocal fluorescence Microscope:
Confocal Fluorescence Microscope: هن قسم جي فلوروسينس مائڪرو اسڪوپ ليزر اسڪيننگ کي فلورسنٽ روشنيءَ سان گڏ ڪري هڪ تصوير ٺاهي ٿي. اهو ايپليڪيشنن جي وسيع رينج ۾ استعمال ٿي سگهي ٿو، جهڙوڪ سيلز ۽ بافتن جو مطالعو، سيلز اندر پروٽين ۽ ٻين مادي کي ڳولڻ، ۽ مواد جي ٿلهي کي ماپڻ.
BS-2081F ريسرچ فلورسنٽ حياتياتي خوردبيني
3. Inverted fluorescence Microscope
هن قسم جي خوردبيني جي روشني جو ذريعو ۽ ڪنڊينسر مٿي تي واقع آهن، منهن هيٺان. روشنيءَ جو زاويو 90 درجن تي هجڻ گھرجي ان نموني جي مٿاڇري جي حوالي سان جيڪو جانچيو پيو وڃي.
BS-2095F Inverted fluorescent Microscope
fluorescence microscopes جا فائدا ۽ نقصان ڇا آهن؟
فائدا:
- جاندار جاندارن ۾ سيلز جي مشاهدي کي قابل بنائي ٿو بغير انهن کي نقصان پهچائڻ
- صحيح رنگن سان اعلي ريزوليوشن تصويرون مهيا ڪري ٿي
- سيلز ۾ رهندڙ عملن جي مطالعي جي اجازت ڏئي ٿي
- سيلز اندر مختلف قسمن جي ماليڪيولن کي سڃاڻڻ لاءِ استعمال ڪيو وڃي، جهڙوڪ پروٽين يا نيوڪليڪ اسيد.
نقصانات:
-اهو صرف فلورسنٽ ڊائي سان ٽيگ ٿيل سيل اندر مخصوص ڍانچي جي مشاهدي جي اجازت ڏئي ٿو.
- فلوروسينس جي عمل دوران اليڪٽران جوش جي ڪري ڦوٽو بليچنگ فلورسنٽ رنگن جي رد عمل واري ماليڪيول کي متاثر ڪري سگھي ٿي. نتيجي طور، رد عمل واري رنگ شايد پنهنجي فلوروسينس اخراج جي شدت جي ڪيميائي ملڪيت کي وڃائي سگھن ٿا.
- سيلز فلوروسنٽ رنگن سان داغ ٿيڻ کان پوءِ فوٽوٽوڪسڪ اثر لاءِ حساس هوندا آهن، ڇاڪاڻ ته فلوروفور ماليڪيولز مختصر طول موج جي روشني مان اعليٰ توانائي فوٽن کي جذب ڪندا آهن.
هڪ fluorescence microscope جي اپليڪيشن ڇا آهن؟
فلورسنس خوردبيني وڏي پيماني تي استعمال ڪيا ويا آهن تحقيق ۽ ايپليڪيشن جي مختلف شعبن ۾ جن ۾ بائيو ڪيمسٽري، سيل بايولوجي، مائڪرو بايولوجي، امونالوجي، ۽ دوائون شامل آهن.
1. حياتيات جي شعبي ۾، فلوروسينس خوردبيني فلورسنٽ ڊائي ليبلنگ جي مدد سان سيلولر ۽ ذيلي مائڪرو اسڪوپي سيلولر اجزاء ۽ سرگرمين جي صحيح ۽ تفصيلي سڃاڻپ کي قابل بڻائي ٿو.
2. طبي ميدان ۾، فلورسنس خوردبيني فلورسنٽ ريجنٽ استعمال ڪري سگھي ٿو بيڪٽيريا ۽ وائرس جي موجودگي ۽ تقسيم کي ڳولڻ لاء، يا سرجري کي آسان ڪرڻ لاء جراحي مقصدن کي ليبل ڪرڻ ۾ مدد ڏيڻ لاء.
3. معدنيات جي شعبي ۾، فلوروسينس خوردبيني اڪثر ڪري مواد جو مطالعو ڪرڻ لاء استعمال ڪيو ويندو آهي spontaneous fluorescence خاصيتن، جهڙوڪ اسفالٽ، پيٽروليم، ڪوئلي، گرافين آڪسائيڊ ۽ ٻين معدنيات.
4. مواد سائنس ۾، فلورسنس خوردبيني کي ڪپڙي جي صنعت يا ڪاغذ جي صنعت ۾ فائبر تي ٻڌل مواد جو تجزيو ڪرڻ لاء استعمال ڪري سگهجي ٿو.
پوسٽ ٽائيم: مارچ-14-2023